Ce référentiel, dont l'utilisation s'effectue sur le fondement des principes déontologiques d'exercice personnel de la médecine, a été élaboré par un groupe de travail pluridisciplinaire de professionnels du réseau ONCOLOR conformément aux données acquises de la science au 23 février 2006

Date de révision : 23 février 2006

Aspects généraux

Ce document précise les modalités de prélèvement et d'analyse des organes lymphoïdes : ganglions, pièces de splénectomie ou d'exérèse tumorale sur un autre site.

Ganglions

1) Choix du ganglion à biopsier

Guidé par l’examen clinique : biopsier le ganglion le plus pathologique (le plus volumineux ou de forme anormale, induré et fixé au plan profond).

Eviter, si possible, les ganglions inguinaux, rétrocruraux et axillaires (car remaniés par des processus fibro-inflammatoires).

2) Comment biopsier le ganglion ?

Chaque fois que possible, biopsie exérèse, en un seul bloc, sans fragmenter le ganglion.

S'il s'agit de ganglions difficilement accessibles (abdomen, médiastin) : envisager une biopsie radioguidée par un radiologue interventionnel expérimenté. Sinon biopsie chirurgicale (laparotomie, médiastinoscopie) avec contrôle extemporané de la qualité du prélèvement.

3) Envoi du ganglion au laboratoire

3.1) Cas où le laboratoire d’Anatomie Pathologique est à proximité du bloc opératoire

Adresser immédiatement le prélèvement dans sa totalité, non recoupé, à l ’état frais enveloppé dans une compresse humide (sérum physiologique) et, de préférence, dans des conditions stériles afin de réaliser une éventuelle étude cytogénétique.

3.2) Cas où le laboratoire d’Anatomie Pathologique est à distance du bloc opératoire :

Si le ganglion mesure moins de 0,5 cm de diamètre : le fixer immédiatement par immersion dans un flacon contenant du formol (fixateur). Eviter d’utiliser le liquide de Bouin.

Si le ganglion mesure plus de 0,5 cm de diamètre :

section du ganglion en deux selon son grand axe,
appositions d’une moitié du ganglion sur lames de verre, puis sécher par
agitation à l’air. L’apposition doit être effectuée après avoir épongé, délicatement la tranche de section du ganglion fixation des deux moitiés du ganglion dans un flacon contenant du formol,
adresser dans les plus brefs délais au Laboratoire d’Anatomie Pathologique avec une fiche de renseignements cliniques.

4) Procédure technique dans le laboratoire lors de la réception du prélèvement à l’état frais

macroscopie : mensurations du ganglion, consistance et aspect,

section du ganglion en tranches parallèles de 0,3 à 0,5 cm d’épaisseur environ, selon le grand axe du ganglion (sclérose, nodules, abcès),

appositions sur lames de verre (6 à 12 lames), séchage à l’air 24 heures (coloration au May-Grünwald Giemsa de 3 d’entre elles). Stockage des autres lames à température ambiante.

congélation de 1 à 2 fragments placés dans un tube plastique étanche immergé immédiatement dans l’azote liquide ou dans l’iso-pentane préalablement refroidi dans de l’azote liquide. Puis le conserver au congélateur,

en l’absence d’azote liquide et si le Laboratoire dispose d’un congélateur (- 20°C), il est souhaitable d’y congeler des fragments de ganglion à l’état frais et non fixés dans du papier d’aluminium (mieux vaut une mauvaise congélation que pas de congélation du tout),

fixation dans du formol de tranches (morphologie, immunohistochimie, biologie moléculaire),

fixation dans du liquide de Bouin, non indispensable et seulement si le matériel est abondant (morphologie).

5) Cas particuliers

5.1) Indication de l’examen extemporané

recherche d’une métastase d’un carcinome connu,

en cas de suspicion de lymphome, il se justifie uniquement pour apprécier le caractère représentatif et la qualité de la biopsie chirurgicale, guidant alors le geste biopsique.

5.2) Cytogénétique

dans certains cas présélectionnés (lymphomes du manteau, anaplasiques à grandes cellules, marginaux, folliculaires, Burkitt),

contacter le Laboratoire de Cytogénétique pour organiser la collecte et le transport d’un prélèvement stérile.

Pièces de splénectomie ou d'exérèse tumorale sur autres sites en cas de suspicion de lymphome

Les techniques sont identiques à celles du ganglion et adaptées à la pièce.
Penser à prélever les ganglions lymphatiques du hile splénique qui sont étudiés de façon identique aux autres ganglions lymphatiques.