Protocoles d'anatomo-pathologie

Sont détaillés le protocole pour les ostéosarcomes et le grading des chondrosarcomes.

Ostéosarcomes : protocoles d'étude des pièces chirurgicales après chimiothérapie première (Huvos)

Prélèvements systématiques sur les berges de la pièce opératoire ainsi que sur les zones jugées suspectes en cours d’intervention.

Dissection
Les plans cutané, sous cutané, puis musculaire sont disséqués jusqu à la tumeur. En cas d’exérèse radicale, les segments sus et sous-jacents à la tumeur de même que les cavités articulaires sont explorés. La cicatrice et le trajet de biopsie initiale sont prélevés. Seul l’os ou les os atteints sont alors gardés. La tumeur, non ouverte, est décrite puis mesurée.

Section de l’os tumoral
Une tranche de 3 à 5 mm d’épaisseur est découpée à la scie sur toute la hauteur de la pièce osseuse, selon le plan de la plus grande extension tumorale (sagittal ou frontal), déterminée d’après les radiographies pré-opératoires ou de la pièce elle-même.

Réalisation d’un schéma
Une photographie et une radiographie de la tranche osseuse sont effectuées ; l’essentiel est un schéma de la tranche osseuse décalqué à partir du cliché radiologique sur lequel sont reportés :
	Les dimensions de la pièce osseuse et de la tumeur,
	La distance du pôle supérieur de la tumeur par rapport à la limite proximale de résection,
	La distance du pôle inférieur de la tumeur (par rapport à l’extrémité inférieure de l’os, ou la limite distale de résection),
	Les limites, nettes ou imprécises, de la tumeur.

Découpage "en grille" de la tranche osseuse
	La tranche est découpée dans sa totalité en carrés de 2 cm de côté qui sont numérotés et reportés sur le schéma. La fixation et la décalcification peuvent être effectuées avant ou après le découpage.

Etude microscopique
	Tous les prélèvements sont inclus en paraffine, coupés à 5 µ et colorés à l’Hématoxyline éosine safran (HES).
	L’efficacité de la chimiothérapie est évaluée par l’importance de la nécrose tumorale, c’est-à-dire la quantité de tumeur viable résiduelle.
	En pratique, le pathologiste évalue au niveau de chaque prélèvement tumoral, le pourcentage de cellules tumorales viables. Une moyenne est effectuée à partir des résultats de la totalité des prélèvements tumoraux, résultat exprimé selon le Score de Huvos (cf infra), permettant de distinguer deux groupes d’ostéosarcome, les bons et les mauvais répondeurs (cf référentiel ostéosarcome).
	Faire un schéma de la "grille" de tranche osseuse avec le pourcentage de cellules tumorales viables pour chaque carré ; ce schéma accompagne le compte-rendu anatomopathologique.

Score de Huvos

Grade I	Plus de 50 % de cellules tumorales identifiables
Grade II	de 5 à 50 % de cellules tumorales identifiables
Grade III	< ou égale à 5 % de cellules viables ou quelques cellules tumorales résiduelles disséminées sur toute la tranche de section
Grade IV	aucune cellule viable (absence de cellule tumorale identifiable)

Le score de Huvos, évalué sur la pièce opératoire, permet de qualifier le malade en "bon" répondeur (grade III et IV) ou "mauvais" répondeur (grade I et II) et d'adapter le traitement en phase post-chirurgicale.

Grades histologiques des chondrosarcomes

Le grading histologique des chondrosarcomes repose principalement sur les caractéristiques cytologiques de la lésion. Il prend en compte la densité cellulaire, la taille des noyaux et le degré d’hyper-chromatisme nucléaire.

S’il existe une assez bonne reproductibilité inter-observateur pour les grades 2 et 3, cette reproductibilité est plus mauvaise pour les grades 1, posant le problème du diagnostic différentiel avec les chondromes.